You are viewing an old version of this page. View the current version.

Compare with Current View Page History

« Previous Version 3 Next »

Initial Screening of CD79B-X-TCS-X-Gal4VP16 was largely uninformititve. The data did not appear to be statistically significant. We think this is likely due to minimal expression of the B-Cell Receptor ~5% drowning out our signal. To attempt to boost our signal, we are optimizing receptor expression relative to Syk-X-TEV/tTEV. Although our data appeared to be insignificant, we selected our three most promising candidates based on normalizing the fluorescent signal to our transfection marker. The linkers selected are S12 12TCS12, S9 9TCS15, and S6 12TCS6.

UntransfectedSingle Color BlueBackground anti-IgM bindingSingle Color RedDouble Color

-VE control (background activation)

-VE control (background cleavage)+VE control
HEK293

HEK293

hEF1a:rtTA

hEF1a:MabH

hEF1a:MabL

hEF1a:Lyn

hEF1a:eBFP

 

hEF1a:CD79A-15TCS15-G4VP16

hEF1a:CD79B

TRE:Syk-15-tTEVp



Dox x uM

HEK293

hEF1a:rtTA

hEF1a:MabH

hEF1a:MabL

hEF1a:Lyn

hEF1a:eBFP

 

hEF1a:CD79A-15TCS15-G4VP16

hEF1a:CD79B

TRE:Syk-15-tTEVp



Dox x uM

anti-IgM

HEK293

hEF1a:rtTA

hEF1a:MabH 

hEF1a:MabL 

hEF1a:Lyn 

 

hEF1a:mKate 

hEF1a:CD79A-15TCS15-G4VP16 

hEF1a:CD79B 

TRE:Syk-15-tTEVp 





Dox x uM

HEK293

hEF1a:rtTA 

hEF1a:MabH 

hEF1a:MabL

hEF1a:Lyn

hEF1a:eBFP

 hEF1a:mKate

hEF1a:CD79A-15TCS15-G4VP16

hEF1a:CD79B

TRE:Syk-15-tTEVp





Dox x uM

HEK293

hEF1a:rtTA

hEF1a:MabH

hEF1a:MabL

hEF1a:Lyn

hEF1a:eBFP

UAS:mKate

hEF1a:CD79A

 

hEF1a:CD79B

TRE:Syk-15-tTEVp



Dox x uM

HEK293

hEF1a:rtTA

hEF1a:MabH

hEF1a:MabL

hEF1a:Lyn

hEF1a:eBFP

UAS:mKate

hEF1a:CD79A-15TCS15-G4VP16

 

hEF1a:CD79B

TRE:Syk



Dox x uM

HEK293

hEF1a:rtTA

hEF1a:MabH

hEF1a:MabL

hEF1a:Lyn

hEF1a:eBFP

UAS:mKate

hEF1a:CD79A

 

hEF1a:CD79B

TRE:Syk-15-tTEVp

hEF1a:GAl4VP16


Dox x uM


WELL 25

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:GMabH 50ng

CuO:GMabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-9tcs15-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

0nM Cumate

WELL 26

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:GMabH 50ng

CuO:GMabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-9tcs15-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

0nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 27

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:GMabH 50ng

CuO:GMabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-9tcs15-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

10nM Cumate

WELL 28

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:GMabH 50ng

CuO:GMabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-9tcs15-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

10nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 29

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:MabH 50ng

CuO:MabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-9tcs15-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

500nM Cumate

WELL 30

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:MabH 50ng

CuO:MabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-9tcs15-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

500nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 31

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:MabH 50ng

CuO:MabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs6-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

0nM Cumate

WELL 32

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:MabH 50ng

CuO:MabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs6-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

0nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 33

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:MabH 50ng

CuO:MabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs6-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

10nM Cumate

WELL 34

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:MabH 50ng

CuO:MabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs6-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

10nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 35

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:MabH 50ng

CuO:MabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs6-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

500nM Cumate

WELL 36

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:MabH 50ng

CuO:MabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs6-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

500nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 37

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:MabH 50ng

CuO:MabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs12-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

0nM Cumate

WELL 38

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:MabH 50ng

CuO:MabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs12-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

0nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 39

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:MabH 50ng

CuO:MabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs12-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

10nM Cumate

WELL 40

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:MabH 50ng

CuO:MabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs12-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

10nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 41

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:MabH 50ng

CuO:MabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs12-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

500nM Cumate

WELL 42

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:MabH 50ng

CuO:MabL 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs12-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

500nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 49

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-9tcs15-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

0nM Cumate

WELL 50

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-9tcs15-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

0nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 51

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-9tcs15-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

10nM Cumate

WELL 52

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-9tcs15-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

10nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 53

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-9tcs15-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

500nM Cumate

WELL 54

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuOVRC01 L50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-9tcs15-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

500nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 55

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs6-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

0nM Cumate

WELL 56

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs6-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

0nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 57

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs6-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

10nM Cumate

WELL 58

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs6-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

10nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 59

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs6-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

500nM Cumate

WELL 60

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs6-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

500nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 61

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs12-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

0nM Cumate

WELL 62

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs12-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

0nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 63

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs12-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

10nM Cumate

WELL 64

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs12-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

10nM Cumate

anti IgM x uM

WELL 65

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs12-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

500nM Cumate

WELL 66

HEK293

hEF1a:rtTA 50ng

hEF1a:CymR 50ng

CuO:VRC01 H 50ng

CuO:VRC01 L 50ng

hEF1a:Lyn 50ng

hEF1a:eBFP 50ng

UAS:mKate 50ng

CuO:CD79A-12tcs12-Gal4VP16 50ng

CuO:CD79B 50ng

TRE:Syk-12-tTEVp 50ng


Dox 1 nM

500nM Cumate

anti IgM x uM


  • No labels